梅毒怎么诊断三种血清学方法_重庆博大男科医院_好男科上博大

梅毒是临床中的传染性疾病，主要是由梅毒螺旋体感染所引起的慢性全身性疾病，性接触是梅毒主要的传播途径，是发病在1年内未经治疗的梅毒患者传染性强。以后随时间的延长，传染性逐渐降低，至感染4年后，一般认为其传染性已经很小。母婴传播也是梅毒常见的传播途径。母婴传播指患有梅毒的母亲将梅毒直接传染给胎儿，传染一般发生于妊娠4个月以后。其他的传播途径通常指接吻、哺乳、输入含有梅毒病原体的血液、通过毛巾或衣物等传染方式，但这些传染方式很少见。如何防治梅毒是临床工作的迫切需要。本病表现较为复杂，可侵犯机体各器官，造成多器官损伤，严重危及了患者的生命安全。近些年，我国梅毒的发病率呈现上升的趋势，故早期诊断和治疗具有重要的临床意义。目前，血清学检测是临床诊断梅毒的重要依据之一，检测结果为临床医师的诊断、治疗及研究方面提供了有效的参考依据。本次研究探讨化学发光免疫法CLIA、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验TPPA及梅毒螺旋体抗体胶体金试验三种血清学诊断方法对梅毒螺旋体的检测效果。现 如下。

1 材料和方法

1.1 一般资料

随机选取我院门诊部2014年至2015年期间收治的梅毒患者120例，经化学发光法筛查血清TP阳性，并设为阳性组，其中男性80例、女性40例，年龄40~55岁，平均年龄46.7±4.2岁，Ⅰ期患者42例、Ⅱ期患者78例。入选标准：符合中华医学会制定的关于梅毒的诊断标准。另选取同期健康人群120例设为阴性组，其中男性82例、女性38例，年龄42~56岁，平均年龄45.7±4.6岁。本次研究经伦理委员会批准通过，患者均签署知情同意书。排除患者精神疾病史、药物过敏史等。两组研究对象的年龄、性别等基线特征大体一致P>0.05，具有可比性。

1.2 方法

对研究对象进行血液采集，取其空腹静脉血2~3mL，常规剂量肝素进行抗凝处理，离心半径15cm，离心速度3000r/min，5min后分离血清，并保存于2~8℃的冰箱中。胶体金法检测：采用厦门英科新创科技有限公司提供的试剂盒，试剂与待测血清样本平衡至室温后，将试剂条放置于台面上，使用微量加样器加入100μL血清样本于孔内，经室温静置20min后结果。根据试剂盒说明书，待检测区与对照组出现两条紫红色条带为阳性，仅对照区出现一条紫红色条带为阴性。CLIA法：采用北京科美东雅生物技术有限公司生产的CHEMCLIN600化学发光免疫仪，按仪器说明书放置配套试剂与标本，标本测试按仪器设定的程序进行，临界值=阴性对照品发光值RLU的平均值×2.1，样品RLU值不低于临界值为阳性，否则为阴性。TPPA试验：采用日本富士株式会社产品生产的TPPA试剂盒，室温下，在U型板上用稀释液将血清稀释，分别加入未致敏、致敏的明胶颗粒，孵育2h结果，检测过程中严格按仪器说明书进行规范操作。

1.3 学处理

应用SPSS 19.0软件对结果进行，计量资料采用均数±标准差x±s表示，比较采用t检验，计数资料采用百分数表示，比较采用χ2检验，P<0.05则差异具有学意义。

2 结果

2.1 三种检测方法检测阳性率情况比较

本次研究中，CLIA法检测的阳性率 ，为95.8%，明显优于其他两种检测法的阳性率94.2%和83.3%，差异具有学意义P<0.01;TPPA法、CLIA法及胶体金法在阴性组检测出阳性率分别为1.7%、7.5%及11.7%，TPPA法的假阳性率明显低于其他两种检测方法，差异具有学意义P<0.01。

2.2 三种检测方法灵敏度和特异性情况比较

本次研究中，三种检测方法中胶体金法检测的特异性88.3%和灵敏度71.8%明显低于其他两种检测方法，差异具有学意义P<0.05。

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梅毒是由梅毒螺旋体引起临床中的性传播疾病，患病后病程较漫长，早期侵犯患者生殖器和皮肤，晚期则累及全身各器官，危害性极大，已引起多方面的重视。临床研究显示，人体感染梅毒后，体内会产生两种抗体：特异性抗体和非特异性抗体。而特异性抗体在感染两周后即可出现，但非特异性抗体感染4~5周后才能检测出来。目前，血清学检测是临床诊断梅毒的重要依据之一，它在梅毒的诊断、治疗及研究方面具有重要的临床意义。因此，敏感性、特异性高的检测方法有助于梅毒的诊治。临床实验室常用来检测梅毒螺旋体感染的血清学方法有CLIA、TPPA和梅毒螺旋体抗体胶体金试验等。TPPA主要针对梅毒特异性梅毒螺旋体抗体的检测方法，检测原理为将纯化的致病性梅毒的菌株成分作为抗原，这种抗原包裹住人工载体明胶颗粒后通过抗原抗体反应，对血清中相对应的抗体进行检测。胶体金实验检验法是采用免疫层析式双抗原夹心法的原理，对梅毒螺旋体特异性抗体进行测定。CLIA法使用多种梅毒螺旋体特异性蛋白抗原对固相抗原进行制备，标记抗原采用辣根过氧化物酶标记的相同蛋白，与梅毒螺旋抗体形成双抗原夹心。洗涤后，将化学发光底物液加入，对发光强度进行测定，判断梅毒螺旋体特异性抗体是否存在。本研究中，三种检测方法中胶体金法检测的特异性88.3%和灵敏度71.8%明显低于其他两种检测方法，差异具有学意义P<0.05，而CLIA和TPPA阳性检出率间比较无明显差异。因此，在检测梅毒特异性抗体时，CLIA和TPPA优于胶体金法。且TPPA法对检测具有较高的特异性和灵敏度，是梅毒诊断的 方法，且在梅毒各个阶段均有较高的特异性及敏感性。但TPPA法操作较繁琐、价格昂贵，不适合临床大规模的病例检测。CLIA法是近些年较为流行的血清检测方法，是ELISA技术的新发展，其特点是酶促增强发光信号，对发光信号时间有延长作用，在克服传统方法光信号持续时间短的同时，保持发光免疫的高灵敏性，但其假阳性较高，本次研究中CLIA在阴性组中的假阳性率较高，为7.5%。故CLIA法检测操作简便，易于自动化，重复性好，且结果判断客观，适合大量样本检测，但检测阳性结果 采用TPPA法进行复检。而胶体金法灵敏度和特异性均较低，故不适合临床对梅毒的诊断，但可采用该方法对梅毒病情进行，以便判断治疗的效果，还可以检测**的情况。

综上所述，三种检测方法中，TPPA法检测梅毒螺旋抗体的阳性率高、假阳性率低、特异性和灵敏度均较高，综合效果 ;而CLIA阳性率 ，但其容易出现假阳性;胶体金试验的假阴性和假阳性均较多，临床可作为辅助检查应用。

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